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中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

　　　 出口禽肉中莫能菌素殘留量檢驗(yàn)方法
　　　　　　　　　 生物自顯影法 SN 0296一93
Method for the determination of monensin
residues in poultry meat for export
?Bioautography method
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1 主題內(nèi)容與適用范圍
　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了出口禽肉中莫能菌素殘留量的抽樣、制樣和生物自顯影測(cè)定法。
　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于出口凍雞中莫能菌素殘留量的檢驗(yàn)。
2　抽樣和制樣
2.1　檢驗(yàn)批
　　以不超過(guò)2500件商品為一檢驗(yàn)批。
　　同一檢驗(yàn)批的商品應(yīng)具有相同特征,如包裝、標(biāo)記、產(chǎn)地、規(guī)格和等級(jí)等。
2.2　抽樣數(shù)量
　　　　　 批量,件　　　　　　　　　　　　zui低抽樣數(shù),件
　　　　　　　　1～25　　　　　　　　 　　　　　　　　1
　　　　　　　26～100　　　　　　　　　　　　　　　　5
　　　　　　　101～250 10
　　　　　　　251～500 15
　　　　　　　501～1000　　　　　　　　　　　　　　　17
　 　　　　　1001～2500　　　　　　　　　　　　　　　20
2.3　抽樣方法
　　按2.2規(guī)定的抽樣件數(shù)隨機(jī)抽取,逐件開(kāi)啟。每件至少取一袋作為原始樣品,原始樣
品總量不少于2kg,放入清潔容器內(nèi),加封后標(biāo)明標(biāo)記,及時(shí)送交實(shí)驗(yàn)室。
2.4　樣品制備
　　從每袋原始樣品中取出部分有代表性樣品,將可食部分放入高速組織搗碎機(jī)中搗碎均
勻,充分混勻,用四分法縮分出不少于1kg試樣。裝入清潔容器內(nèi),加封后標(biāo)明標(biāo)記。
2.5　樣品保存
　　將試樣于?18℃冷凍保存。
　　注：在抽樣及制樣過(guò)程中,必須防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。
3　測(cè)定方法
3.1　方法提要
　　用甲醇提取肉樣中莫能菌素,經(jīng)四氯化碳萃取后濃縮至干,以甲醇溶解殘留物,用薄
層分離,再用生物自顯影法測(cè)定。
3.2　設(shè)備和材料
3.2.1　微量注射器：50 μL。
3.2.2　薄層板：硅膠,Q/YT 257?85SG,5cm×20cm,使用前110℃活化2h。
3.2.3　展開(kāi)缸：240mm×57mm×32mm。
3.2.4　游標(biāo)卡尺：測(cè)量范圍0～200mm,精度0.02mm或使用抑菌圈測(cè)量?jī)x測(cè)量。
3.2.5　離心機(jī)：轉(zhuǎn)速3000 r/min。
3.2.6　旋轉(zhuǎn)濃縮器。
3.2.7　恒溫培養(yǎng)箱：37±1℃。
3.2.8　高壓滅菌器。
3.2.9　長(zhǎng)方形培養(yǎng)皿：20cm×10cm×5cm。
3.2.10 均質(zhì)器：帶均質(zhì)杯250mL。
3.3　試劑和培養(yǎng)基
3.3.1　試劑
3.3.1.1　甲醇：分析純。
3.3.1.2　四氯化碳：分析純。
3.3.1.3 乙酸乙酯: 分析純。
3.3.1.4　莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)品: 960μg（效價(jià)）/mg（中國(guó)獸藥監(jiān)察所提供）。
3.3.1.5　試驗(yàn)菌種：枯草桿菌（Bacillus subtilis）, 菌種號(hào)ATCC 6633（衛(wèi)生部藥品生物
制品檢定所提供）。
3.3.2　培養(yǎng)基
3.3.2.1　菌種用培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A 第A1章）。
3.3.2.2　生物自顯影用培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A第A2章）。
3.3.2.3　肉湯培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A第A3章）。
3.4　測(cè)定步驟
3.4.1 工作液制備

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